紫外可見分光光度計的波長定位原理與實現(xiàn)
在理化分析中zui常用到的儀器就是分光光度計,這種儀器的基本原理主要是建立在與光和物質(zhì)相互作用的基礎(chǔ)上,當(dāng)某一溶液當(dāng)中其吸收的輻射的物質(zhì)分子與光子發(fā)生碰撞的時候,也就會產(chǎn)生一種吸收,對于其吸光度值的大小進行測量可以有效的對某種物質(zhì)存在的量的多少進行反應(yīng)。本研究基于此,主要分析紫外可見分光光度計在其使用過程中波長定位問題,希望所得的結(jié)果能夠為相關(guān)領(lǐng)域提供有價值的參考。
紫外可見分光光度計是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對物質(zhì)進行定性和定量分析的儀器。在生物制藥、精細化工、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用,并被納入《中華人民共和國強制檢定的工作計量器具明細目錄》,需要根據(jù)檢定規(guī)程定期檢定。文章再次探討紫外可見分光光度計的波長定位原理與實現(xiàn).
1 紫外可見分光光度計
1.1 紫外可見光光度計結(jié)構(gòu)、特點
紫外可見光光度計是一種常規(guī)分析儀器,充分利用紫外可見光度法原理。以光路設(shè)計為基礎(chǔ),紫外可見分光光度計可以分為不同的類型,比如,雙波長分光光度計、單光束分光光度計。就其結(jié)構(gòu)來說,紫外可見光光度計是由多種元素組成,比如,輻射源、單色器、檢測器。比如,輻射源在應(yīng)用過程中,它必須具備特殊性質(zhì)的連續(xù)光譜,比如,較強的穩(wěn)定性,充足的輸出功率。比如,試樣容器。它又被叫做吸收池,主要為那些盛放試液提供條件,進行吸光度測量。玻璃池、石英池是其核心組成元素,石英池主要用于紫外到可見區(qū),而玻璃池只能用于可見區(qū)方面。一般來說,容器的光程需要在0.5-10cm之間。又比如,顯示裝置。顯示裝置的發(fā)展速度非常快,其中的熒光屏顯示、記錄儀器等能夠把數(shù)據(jù)、圖譜等充分顯示出來。同時,紫外可見光光度計具有多樣化的特點。首先,它具有較高的靈敏度、較好的選擇性、使用范圍非常廣泛。
1.2 紫外可見分光光度計應(yīng)用范圍
從某個側(cè)面來說,紫外可見分光度計的應(yīng)用范圍非常廣泛,比如,定量分析、定性于結(jié)構(gòu)分析。一是:定量分析。
在定量分析方面,紫外可見光光度計主要用于各種物料中,比如,微量、超微量的準(zhǔn)確測定。二是:反應(yīng)動力學(xué)研究方面。在這方面,紫外可見光光度計主要是對其中的反應(yīng)物具有的濃度進行研究。在時間不斷變化情況下,對應(yīng)的函數(shù)關(guān)系。以此為基礎(chǔ),對其反應(yīng)速度、反應(yīng)級數(shù)、反應(yīng)原理進行的測定。三是:定性與結(jié)構(gòu)分析方面。主要是因為紫外可見光光度計還可以應(yīng)用到這些方面,比如,互動異構(gòu)、幾何異構(gòu)現(xiàn)象推斷方面,具有很高的準(zhǔn)確率。
2 .波長示值誤差項目檢定中需注意的問題
波長示值誤差是一項重要指標(biāo),規(guī)程中對該項指標(biāo)的檢測,給出了多種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行選擇。選擇哪一種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),要根據(jù)儀器的情況。一般zui常用的波長標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是氧化鈥玻璃濾光片、鐠釹玻璃濾光片。因其使用zui方便(不用打開儀器光源部分),汞燈等波長標(biāo)準(zhǔn)需放到光源部分,操作起來相對麻煩。但由于氧化鈥玻璃等濾光片需要通過高等級紫外可見分光光度計對參考波長定值后才可用于對相對等級較低的儀器進行檢測,所以使用時需充分考慮定值時使用的紫外可見分光光度計的性能,尤其需要考慮到儀器的光譜帶寬,定值用儀器的光譜帶寬多設(shè)定為 2nm。但大多數(shù)儀器的光譜帶寬是固定的,而且較大,尤其是低檔儀器,如752型紫外可見分光光度計光譜帶寬為 4nm。同一臺紫外可見分光光度計在其他條件不變下,光譜帶寬分別設(shè)定為 0.5nm、2.0nm、5.0nm 時使用氧化鈥玻璃和鐠釹濾光片掃描得到的峰值數(shù)據(jù),可見當(dāng)儀器的光譜帶寬發(fā)生變化時,使用氧化鈥玻璃或
鐠釹玻璃濾光片檢測得到的波長誤差存在著較大的差異,對于光譜帶寬較大的儀器甚至部分波峰檢測不到。而且對于具備自動掃描功能的儀器,掃描速度同樣對檢測結(jié)果有著不可忽視的影響。
3 .紫外-可見分光光度計測量誤差超差的調(diào)修
3.1 波長示值誤差超差的調(diào)修
如果紫外-可見分光光度計的波長示值誤差超出規(guī)程規(guī)定的范圍必須進行調(diào)修,調(diào)修后再次經(jīng)檢定合格后方能使用.
常見的波長示值誤差超差的情況可以分為兩種:線性誤差。線性誤差的特點是儀器三個波長段的波長誤差偏向同一方向且數(shù)值相近。調(diào)修方法為:首先將波長調(diào)節(jié)至580nm處,然后在樣品池光路中放置一張白紙查看單色光的顏色,若不是橙黃色需調(diào)節(jié)波長使白紙上的單色光成為橙黃色且邊緣清晰和無雜色。接著將波長刻度盤的螺母擰松并旋轉(zhuǎn)至 580nm.再使用濾光片或標(biāo)準(zhǔn)溶液檢定波長誤差,為了進一步縮小波長誤差可再次擰松刻度盤螺母使刻度盤向相反方向旋轉(zhuǎn)相同
誤差的刻度,直至調(diào)節(jié)到合格范圍之內(nèi)。非線性誤差。非線性誤差的特點是儀器三個波段的波長誤差有正有負。調(diào)修時需首先將儀器中間波段的波長利用上述方法調(diào)為準(zhǔn)確,然后根據(jù)偏移情況進行調(diào)節(jié):對于低端為正差和為負差的現(xiàn)象可順時針調(diào)節(jié)準(zhǔn)直螺母;對于低端為負差和為正差的現(xiàn)象可逆時針調(diào)節(jié)準(zhǔn)直螺母。
3.2 基線平直度超差的調(diào)修
基線平直度超差的原因通常有:濾光片或其它光學(xué)元件被灰塵、水珠或者霉斑污染發(fā)生散射現(xiàn)象造成,對光學(xué)元件進行清理后問題可以得到解決。濾光片安裝不牢固或者不正確,波長調(diào)整時易產(chǎn)生較大噪聲,應(yīng)對濾光片的安裝進行檢查。鎢燈與氘燈切換時基線發(fā)生較大的跳動說明光源的切換存在問題,應(yīng)檢查光源的切換是否存在問題。儀器使用時間太長光電轉(zhuǎn)換器和放大器易發(fā)生老化,更換后可以降低基線
平直度誤差。電壓不穩(wěn)或電磁干擾也會對基線平直度造成較
大的影響,電壓不穩(wěn)的實驗室應(yīng)加裝穩(wěn)壓器。
在新時代下,很多新技術(shù)、新材料會逐漸應(yīng)用到紫外可見分光光度計,使其更加完善,擁有更多的性能,具有更好的應(yīng)用價值,在更多的領(lǐng)域中發(fā)揮自身的作用。從長遠來說,它具有很好的發(fā)展前景,必定會走上可持續(xù)發(fā)展道路。
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