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紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室中十分常見(jiàn)的儀器之一，本文就紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在檢定中常見(jiàn)的幾個(gè)問(wèn)題進(jìn)行解析, 例如：在實(shí)驗(yàn)中誤差的來(lái)源進(jìn)行分析與誤差的解決方法，還有儀器出現(xiàn)相關(guān)問(wèn)題（如：吸收池的使用方法，儀器的預(yù)熱等） 的解決方法，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢驗(yàn)和矯正.

引言

紫外分光光度計(jì)，是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜來(lái)研宄物質(zhì)的 結(jié)構(gòu)、成分和物質(zhì)間相互作用的有效手段。此光度計(jì)可以在 紫外可見(jiàn)光區(qū)任意選擇不同波長(zhǎng)的光。通過(guò)每種物質(zhì)*的、 固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上某些特征波長(zhǎng)處的 吸光度高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量。而在日常生活和生產(chǎn) 過(guò)程中，難免會(huì)出現(xiàn)些問(wèn)題，接下來(lái)就常見(jiàn)的一些問(wèn)題進(jìn)行 探討。

1.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢定常見(jiàn)問(wèn)題的探討

雜散光問(wèn)題:雜散光的存在使紫外可見(jiàn)光純度會(huì)降 低，從而使檢測(cè)的誤差增大。雜散光使紫外分光光度計(jì)的準(zhǔn) 確性己經(jīng)不正確。雜散光的產(chǎn)生與整臺(tái)儀器有著密不可分的 關(guān)系，可能由于光敏部位的密封不嚴(yán)，光學(xué)元件的錯(cuò)位、損 壞、不潔凈、老化有關(guān)。

解決雜散光的對(duì)策：由于該光度計(jì)計(jì)的光敏元件是十分 靈敏，要想保持元件的溫度正常則必須進(jìn)行必要的散熱， 然而通過(guò)散熱，空氣中的灰塵會(huì)從散熱孔中吸入從而在光敏 元件上進(jìn)行附著，灰塵的附著會(huì)使雜散光超差。解決這些灰 塵，使用酒精擦拭可以解決，使用吹風(fēng)機(jī)進(jìn)行吹干防止酒 精的殘留。由于反光鏡的制作具有特殊性，軟膜鍍于表面， 所以只能采用火棉膠進(jìn)行除塵，這樣才能保持鍍于表面的 軟膜不被破壞。另一個(gè)容易引起雜散光超差的原因是紫外可 見(jiàn)光光度計(jì)元件的位移。一是由于準(zhǔn)直鏡導(dǎo)致，修復(fù)此故障 需要進(jìn)行調(diào)節(jié)準(zhǔn)直鏡的螺母，調(diào)節(jié)到誤差消除，直到達(dá)到 檢定要求。二是由于聚焦失常，由于聚光鏡和光源燈錯(cuò)位， 使光斑中出現(xiàn)雜色或者光暈在光斑中出現(xiàn)。這時(shí)需要調(diào)整焦 距與光源的位置直至出現(xiàn)一半光斑，純凈且均勻，此時(shí)說(shuō) 明調(diào)整完成，固定好光源位置便可

基線平直度的問(wèn)題：在紫外可見(jiàn)光光度計(jì)中基線 平直度作為主要的技術(shù)參數(shù)，十分重要。由于基線平直度、 漂移和噪聲此三者的綜合作用，讓紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)性 能突出。當(dāng)基線平直度的超出誤差范圍時(shí)，扭曲值和假峰值 便會(huì)在光度計(jì)圖譜上出現(xiàn)，從而大大降低光度計(jì)的準(zhǔn)確性。

解決基線平直度的對(duì)策：使基線平直度超差的原因可能 是光的散射，光敏元件被污染等等，通過(guò)對(duì)光學(xué)軟件的雜質(zhì) 進(jìn)行清理來(lái)進(jìn)行基線平直度的調(diào)修。如果發(fā)現(xiàn)在光源切換時(shí) 基線發(fā)生較大跳動(dòng)時(shí)，需要通過(guò)光源的檢查與校正來(lái)解決此 問(wèn)題。當(dāng)儀器使用長(zhǎng)時(shí)間以后，要及時(shí)得到進(jìn)行保養(yǎng)與維修 來(lái)進(jìn)行基線平直度的消除。同時(shí)通過(guò)穩(wěn)壓器的安裝來(lái)確保電 壓的穩(wěn)定。

2.儀器預(yù)熱問(wèn)題的討論

關(guān)于儀器的預(yù)熱，一般分光計(jì)光度計(jì)的說(shuō)明書(shū)上 的要求大約為20分鐘；如果是帶微處理器的分光光度計(jì)， 儀器開(kāi)機(jī)后大約有10分鐘的左右時(shí)間進(jìn)行自檢。而就在分 光計(jì)的預(yù)熱過(guò)程中，會(huì)存在這樣那樣的問(wèn)題，例如：認(rèn)為儀 器的初始化過(guò)程便是加熱過(guò)程，開(kāi)機(jī)只預(yù)熱電路系統(tǒng)。

預(yù)熱的目的：通過(guò)進(jìn)行儀器的預(yù)熱，是儀器達(dá)到的使用過(guò)程，使得數(shù)據(jù)的測(cè)量更加穩(wěn)定與準(zhǔn)確。通過(guò)儀 器的預(yù)熱，會(huì)使光路系統(tǒng)處于穩(wěn)定的狀態(tài)，使電子元件（電 容、電阻）的穩(wěn)定。

預(yù)熱的正確方法：1、對(duì)于一般的分光光度計(jì)，通 電后，調(diào)節(jié)測(cè)定選擇靈敏檔及波長(zhǎng)值，在光路上放置一個(gè)吸 收池，將吸收池中裝上純水，調(diào)“ 0%T”及“ 100%T” 后，將 吸收池的暗箱蓋蓋上，將儀器預(yù)熱大約20分鐘，當(dāng)儀器所 顯示的讀數(shù)不再變化后便進(jìn)行測(cè)定。2.對(duì)于帶有微處理器有 自檢功能的分光光度計(jì)，開(kāi)機(jī)儀器進(jìn)行自檢結(jié)束后，將所需 的波長(zhǎng)值在測(cè)定窗口上進(jìn)行設(shè)置，同樣將裝有純水的吸收池 放置與光路上，調(diào)“0000A”后，將儀器進(jìn)行預(yù)熱，當(dāng)儀器 所顯示的讀數(shù)不再發(fā)生變化后進(jìn)行測(cè)定。

由于紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)具有雙光源，為了燈的使用壽 命，開(kāi)機(jī)自檢結(jié)束后關(guān)掉不需要使用的光源。

3.分光光度計(jì)檢定中的誤差分析

由于檢測(cè)方法的不當(dāng)引起的誤差：連續(xù)法經(jīng)常使 用于對(duì)于波長(zhǎng)示值得檢測(cè)，此方法是通過(guò)對(duì)連續(xù)的驅(qū)動(dòng)波 長(zhǎng)的檢測(cè)，利用儀器自身的投射比示值的變化來(lái)測(cè)試。這種 檢測(cè)方法會(huì)使測(cè)得的光譜產(chǎn)生很大的影響（由于光譜曲線的 影響），這種方法終經(jīng)實(shí)踐后被否定。根據(jù)JJG178-2007 的規(guī)定，可以使用逐點(diǎn)法。逐點(diǎn)法是可以保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的 一種方法，該方法可以將儀器的波長(zhǎng)大限度的反映出來(lái)。 按照該方法規(guī)定的要求進(jìn)行檢測(cè)便可以減少誤差的產(chǎn)生。

由于檢測(cè)的環(huán)境的不符合所造成的誤差：當(dāng)進(jìn)行 物質(zhì)的檢測(cè)時(shí)，可能受到檢測(cè)的環(huán)境的影響，環(huán)境的不符合 會(huì)造成誤差。例如：若未對(duì)分光光度計(jì)進(jìn)行處理（即密封處 理），或者儀器的密封性不是很好，會(huì)讓強(qiáng)光直接照射光源 系統(tǒng)，從而使雜散光減少，使檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生誤差。如果環(huán)境 中含有較多的灰塵，會(huì)使灰塵沾染到濾光片，從而產(chǎn)生誤差。

4.波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢查與矯正 在平常使用分光光度計(jì)時(shí)，并不需要進(jìn)行儀器波長(zhǎng)準(zhǔn)確 度的檢查。若在平常測(cè)定中發(fā)現(xiàn)靈敏度下降，此時(shí)才需要進(jìn) 行檢查，簡(jiǎn)單的檢查方法是當(dāng)儀器開(kāi)機(jī)后，將波長(zhǎng)調(diào)節(jié)為 580nm，將一張白紙插入到吸收池座的通光道中，如果有一 長(zhǎng)方形的黃色光斑出現(xiàn)在白紙上，這就說(shuō)明該波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是 在正常的范圍，如果未出現(xiàn)，則需要進(jìn)行波長(zhǎng)矯正。如果儀 器在長(zhǎng)途搬運(yùn)后，如果更換光源的燈泡或者受到機(jī)械振動(dòng)以 后，則要進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢查和矯正。矯正的方法有：利 用氪燈的特征發(fā)射線矯正法，干涉濾光片法等。

5.結(jié)論

綜上，當(dāng)我們使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的檢定過(guò)程中， 一定要遵循說(shuō)明書(shū)的操作過(guò)程，以及規(guī)定的相關(guān)的工作規(guī)范， 同時(shí)注意保持相關(guān)的環(huán)境，盡量制造少塵的、甚至無(wú)塵的環(huán) 境來(lái)進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的校檢，同時(shí)，當(dāng)我們?cè)诜止?光度計(jì)的日常使用和操作過(guò)程中，對(duì)儀器的日常維護(hù)是必不 可少的，若我們長(zhǎng)期不使用分光光度計(jì)，需要進(jìn)行除潮的操 作，定時(shí)進(jìn)行開(kāi)機(jī)，如:在半個(gè)月的進(jìn)行通電預(yù)熱15分鐘， 讓分光光度計(jì)保持在干燥的狀態(tài)。當(dāng)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的 氪燈使用的時(shí)間接近或者超過(guò)了 500h的壽命，燈能量降低 到甚至通不過(guò)檢查，此時(shí)，我們需要換新燈進(jìn)行解決。我們 在日常使用過(guò)程中，同時(shí)需要保持溫度的恒定，來(lái)營(yíng)造一個(gè) 適合紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)工作的環(huán)境。